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對于紫外可見(jiàn)分光光度計,你了解多少?

發(fā)布日期:2021-09-16        訪(fǎng)問(wèn)次數:2159

紫外可見(jiàn)分光光度計的用途之一是物質(zhì)的鑒定,主要是用來(lái)測量待測的未知或者已知的物質(zhì)對可見(jiàn)光的吸光度,并且同時(shí)的進(jìn)行定量分析。用途之二是進(jìn)行待測物質(zhì)和標準物及標準圖譜對照的分析。用途之三是用來(lái)比較某種物質(zhì)比較大的吸收波長(cháng)吸收系數一致性。用途之四是進(jìn)行物質(zhì)的純度檢驗。紫外可見(jiàn)分光光度計的用途之五是用來(lái)推測化合物的分子結構以及其構成等。用途之六是判定絡(luò )合物的組成測定。

  A.紫外可見(jiàn)分光光度計的原理:

  紫外可見(jiàn)分光光度計的工作原理:基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律,即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。

  通常表述為:當一束平行的單色光通過(guò)某一均勻的有色溶液時(shí),溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比,其數學(xué)表達式如下:

  A=-lg( It/I0 )= - lgT= =εbC

  式中,A 為吸光度;I0為入射的單色光強度;It為透射的單色光強度;T為物質(zhì)的透射率;ε為摩爾吸光系數(L·mol-1·cm-1);b為被吸收層厚度(cm),即比色皿的光程;C為物質(zhì)的摩爾濃度(mol·L-1);

  B.紫外可見(jiàn)分光光度計常見(jiàn)應用:

  紫外可見(jiàn)分光光度計廣泛應用于制藥、醫療衛生、化工、能源、機械、冶金、環(huán)保、地質(zhì)、食品、生物、材料、農業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等行業(yè),在高等教育、計量科學(xué)和科研院所中的教學(xué)、科研領(lǐng)域,以及生產(chǎn)中的質(zhì)量控制,原材料和產(chǎn)品檢驗等各方面發(fā)揮著(zhù)重要作用,是理化實(shí)驗室常用的分析儀器。

  C.紫外可見(jiàn)分光光度計的光譜范圍:

  常見(jiàn)的紫外可見(jiàn)分光光度計的波長(cháng)范圍為190-1100 nm。通常所指的可見(jiàn)光譜范圍為400-700 nm,是指被人眼能感知到的光譜范圍,200-400 nm為紫外光譜范圍。一般,在可見(jiàn)區測試的樣品必須是有色物質(zhì)。

  D.紫外可見(jiàn)分光光度計具體應用如下:

  1)核酸、蛋白濃度測量以及細菌生長(cháng)濃度測量。

  2)食品、水質(zhì)、合金等樣品中的金屬元素(如鐵、錳、鎘、銅、鋁等)及非金屬元素(如硅、磷/磷酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、氟化物等)分析。

  3)與其他分析儀器聯(lián)用,并進(jìn)行定性分析,如有機化合物的分析、藥物分析。常見(jiàn)的 分析手段如:與標準物及標準圖譜對照;比較大吸收波長(cháng)吸收系數的一致性。

  E.紫外可見(jiàn)分光光度計的使用方法:

  1)溶液裝入比色皿約2/3高度處為宜;盡量避免氣泡的產(chǎn)生;若溶液殘留在比色皿外壁,應及時(shí)擦拭干凈(先用濾紙吸干,然后用擦鏡紙輕拭光面);對于易揮發(fā)的樣品,建議使用比色皿蓋;盡量避免沾污樣品架,否則應及時(shí)擦去樣品架上殘留液體。

  2)比色皿使用完畢應及時(shí)清洗,并用適當的方法清洗,若清洗不當或沒(méi)有清洗干凈,也會(huì )影響測量結果的準確度和穩定性。

  3)測試過(guò)程中,若某一光源不用,可選擇將其關(guān)閉,以延長(cháng)燈的使用壽命;儀器不用時(shí),請及時(shí)關(guān)機、并拔掉電源插頭,以防止雷雨天氣可能造成的損壞。

  4)請勿擅自拆卸儀器外殼和內部零部件,尤其是光路結構部分,切勿隨意松動(dòng)其緊固螺釘和螺母;請勿隨意觸碰各光學(xué)表面(包括光源),以免影響儀器的正常工作、甚至造成人為損壞。

  5)保持儀器表面和工作環(huán)境的清潔;杜絕使用汽油、乙mi等有機溶液擦拭儀器外殼;儀器不用時(shí)可用防塵罩進(jìn)行防護。

  6)紫外可見(jiàn)分光光度計應避免長(cháng)期不用,建議定期開(kāi)機確保其能正常運轉;溫、濕度較高的地區應特別注意防潮。


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